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熒光顯微鏡在各領(lǐng)域中的應(yīng)用都非常廣泛，在植物細胞的觀察研究中，通過染色可以更清晰地觀測到細胞的形態(tài)及結(jié)構(gòu)。在實驗匯總發(fā)現(xiàn)，熒光顯微鏡還可以直接（不做任何處理）觀察植物葉的氣孔器，而且能觀察到氣孔的變化情況，為熒光顯微鏡找到了一種新用途。
熒光顯微鏡是利用特定波長的光照射被檢測物體長生熒光進行鏡檢的顯微光學(xué)觀測儀器。
1. 熒光顯微鏡在各領(lǐng)域的應(yīng)用
（1） 熒光顯微鏡的應(yīng)用包括一般熒光染色和免疫熒光染色方法，熒光染色方法可以顯示細胞內(nèi)的各種成分，特別是對細胞內(nèi)的兩種核酸（DNA或RNA）及酸性粘多糖有較強的特異性和熒光方法的敏感性，作為一種良好的細菌化學(xué)方法。免疫熒光方法是把免疫學(xué)的特異性和熒光方法的敏感性，作為一種研究方法或?qū)嶒炇侄�，廣泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域內(nèi)各種基礎(chǔ)理論研究和臨床診斷，如組織細胞學(xué)，微生物學(xué)，寄生蟲學(xué)，病理學(xué)的研究以及自身免疫病診斷。20世紀30年代熒光染色即已用于細菌、霉菌等微生物及細胞、纖維等的形態(tài)觀察和研究。40年代創(chuàng)造了熒光燃料標(biāo)記蛋白質(zhì)的技術(shù)，這種技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于免疫熒光抗體染色的常規(guī)技術(shù)中，可檢查和定位病毒、細菌、霉菌、原蟲、寄生蟲及動物和人的組織抗原與抗體，可用以探討病因及發(fā)病機理，如腎小球疾病的分類及診斷等。
（2） 熒光顯微鏡在植物研究中的應(yīng)用也非常廣泛。利用某些物質(zhì)在短光波照射下即可發(fā)生熒光的特性，對植物細胞用熒光顯微鏡進行觀察研究。如細胞內(nèi)大部分脂質(zhì)和蛋白質(zhì)經(jīng)照射均可發(fā)出淡藍色熒光，而葉綠體發(fā)出火紅色熒光。但大部分物質(zhì)仍需要用熒光燃料（如吖啶橙、異硫氰酸熒光素等）染色后，在短光波照射下才能發(fā)出熒光。如線粒體、微管等細胞器，在普通光學(xué)顯微鏡下很難觀測到，而通過染色及熒光標(biāo)記后，就能夠很清晰的進行觀測研究�，F(xiàn)在在植物細胞凋亡機理的研究中對線粒體進行染色后，用熒光顯微鏡能夠很清晰地觀察到活細胞核呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè)，可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。利用熒光標(biāo)記技術(shù)顯示微管，可以在多種植物生殖細胞內(nèi)清楚地看到微管骨架的存在。
2. 植物觀察中的新用途
在熒光顯微鏡的管理和使用中發(fā)現(xiàn)。用熒光顯微鏡可以直接觀察植物葉表皮的氣孔。為熒光顯微鏡找到了一種新的用途。具體方法如下：
（1） 打開電源開關(guān)，與此同事，電源指示綠燈點亮，點燃2~3min后，光線將穩(wěn)定。
（2） 燈位調(diào)中，落射式熒光顯微鏡在物鏡轉(zhuǎn)換器上裝上定心屏調(diào)節(jié)燈位中心。
a. 打通光路，將光路中擋光板放在光完全通過的位置。
b. 視場光闌“F”和孔徑光闌“A”旋到較大位置。
c. 將物鏡旋出光路；并從物鏡轉(zhuǎn)換器上拆一個防塵帽蓋，裝上定心屏，就在定心屏上出現(xiàn)弧形圖角或其他圖像。
d. 用調(diào)焦柄（在燈室前）對弧形進行調(diào)節(jié)，使其達較清楚，并通過燈泡調(diào)中螺絲對弧形調(diào)中。
（3） 熒光觀察：為防止紫外線進入人的眼睛，在鏡檢中必須使用UV遮光罩。使用遮光板遮擋可見光。
3. 結(jié)論
在紫外光激發(fā)下，葉綠體發(fā)出火紅色熒光，氣孔發(fā)綠色熒光，保衛(wèi)細胞呈黃色或黃綠色，且形狀大小非常清晰，兩保衛(wèi)細胞內(nèi)的火紅色葉綠體則環(huán)繞氣孔排成一圈。表皮細胞內(nèi)的葉綠體數(shù)量要比葉肉細胞少，所以在熒光顯微鏡下看不到表皮細胞。通過大量試驗證明，單子葉，雙子葉，裸子植物大都適用于這種方法而且效果較好。
熒光顯微鏡的這一用途，在觀察植物葉片氣孔的形態(tài)、密度、開閉程度等方面，操作方法簡單，即節(jié)省時間又節(jié)約經(jīng)費，且觀察效果好。
本文關(guān)鍵詞：熒光顯微鏡，新用途
原文地址:http://kekezt.cn/news/201147101326.htm
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